在 DNA - 蛋白质互作研究的 “江湖” 里,有一款超牛的技术 ——Multi-CUT&Tag !它凭借独特的优势,迅速成为科研 er 们探索生命奥秘的得力助手,今天就带大家一探究竟!
技术原理超硬核
传统研究 DNA - 蛋白质互作的方法或多或少存在一些局限,而 Multi-CUT&Tag 技术则另辟蹊径!它巧妙地利用 Tn5 转座酶和特异性抗体。抗体与目标蛋白质结合后,引导 Tn5 转座酶精准定位到 DNA - 蛋白质互作位点,然后 Tn5 转座酶对 DNA 进行切割并添加测序接头,直接高效地捕获互作信息。相比于传统的 ChIP-seq,Multi-CUT&Tag 无需超声破碎,大大减少了样本损耗,还能降低背景信号干扰,让研究结果更加准确可靠!
应用场景超丰富
01
神经科学领域
2022 年 12 月,Gonçalo Castelo - Branco 课题组在《Nature Biotechnology》上发表研究 ,通过 anti - mouse Tn5 和 anti - rabbit Tn5,针对鼠抗和兔抗在鼠脑中实现特异性的 Multi - CUT&Tag 技术应用。此研究非常详细地剖析大脑中的祖细胞如何特化成少突胶质细胞,为我们在疾病背景下如何刺激少突胶质细胞群的恢复提供线索,帮助我们深入了解大脑神经细胞的分化机制。
02
免疫学研究
美国纽约基因组中心 Ivan Raimondi 团队于 2022 年 12 月在《Nature Biotechnology》发表成果 ,在不同免疫细胞,如 PBMCs 和 BMMCs 中,使用纳米抗体偶联的 Tn5 酶实现了单细胞多靶标的 CUT&Tag 研究。不仅获得了高分辨率的多模态图,还扩展了技术,能同时分析细胞表面蛋白表达和多模态染色质状态,极大推动了免疫系统细胞的研究进展。03
发育生物学
在研究细胞分化和发育过程中,Multi - CUT&Tag 可同时检测多种染色质特征的变化,助力了解基因调控网络在单细胞水平如何协调细胞发育命运。相关研究成果可参考发表于《Nature Protocols》的论文 “Multi - CUT&Tag to simultaneously profile multiple chromatin proteins” 。该研究展示了 Multi - CUT&Tag 在小鼠胚胎干细胞和滋养层干细胞中的应用,为探究胚胎发育早期细胞分化机制提供了关键数据 。
产品优势超给力
01
多靶标同时检测
Multi-CUT&Tag 最大的亮点之一就是能够同时检测多个蛋白质与 DNA 的互作。一次实验就能获取多种蛋白质的结合信息,不仅节省了大量的样本、时间和实验成本,还能更全面地解析复杂的调控网络,让研究效率直线飙升!
02
超高灵敏度与特异性
得益于独特的酶切和标记方式,即使是微量样本,Multi-CUT&Tag 也能精准捕获 DNA - 蛋白质互作信号。并且,它对目标位点的识别特异性极高,能够有效区分特异性结合和非特异性结合,确保研究数据真实有效,为科研成果保驾护航。
03
操作简便易上手
翌圣全球首发的 Multi-CUT&Tag 试剂盒配套完善(货号12592ES),包含了实验所需的各种关键试剂。科研人员只需按照标准化的操作流程,准备好样本和简单的实验设备,就能轻松开展实验。即使是实验新手,也能快速掌握,大大降低了技术门槛。
表1.翌圣Multi-CUT&Tag试剂盒组分原理
组分名称 |
组分原理 |
|
BOX-I |
ConA Beads |
ConA beads为包被了伴刀豆球蛋白A的磁珠,结合细胞膜糖蛋白,从而捕获细胞 |
DNA Extract Beads |
提取DNA的磁珠 |
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DNA Selection Beads |
DNA纯化及分选磁珠 |
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BOX-II |
10 x Binding Buffer |
细胞捕获缓冲液 |
10 x Wash Buffer |
细胞洗涤缓冲液 |
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5% Digitonin |
增加细胞膜通透性,在细胞表明打孔,便于后续转座切割 |
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50 x PB Buffer |
抗体结合缓冲液 |
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10 x Dig-300 Buffer |
转座酶结合缓冲液 |
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Anti-mouse Tn5 |
偶联抗鼠二抗的Tn5复合体 |
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Anti-rabbit Tn5 |
偶联抗兔二抗的Tn5复合体 |
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33 Activating Buffer |
含镁离子,激活Tn5转座活性 |
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15 x Terminate Solution |
终止转座酶活性,同时裂解细胞,释放DNA |
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30 x Proteinase K |
消化蛋白质,释放蛋白质结合的DNA |
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DNA Spike-in Mix (5 ng/μL) |
来源于Ecoli.的三段序列,用于后续分析的标准化 |
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2xHiFi Amplification Mix |
文库扩增酶 |
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i5 Universal Primer |
文库接头 |
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i7 Index Primer (T701) |
文库接头,含测序index |
这么宝藏的 DNA - 蛋白质互作研究利器,真的太香了!无论是基础科研,还是应用研究,Multi-CUT&Tag 都能大显身手。还在为 DNA - 蛋白质互作研究发愁的宝子们,赶紧码住,说不定下一个科研突破就靠它啦!
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产品定位 |
产品名称 |
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